**CryoStor® CS10**是一种无血清、即用型细胞冻存液，专为细胞和组织的低温保存设计，旨在确保细胞在冷冻和解冻过程中维持高活性和功能的完整性。以下是详细的使用说明：

1. 产品基本信息

产品名称：CryoStor® CS10 (100-1061)
规格：通常提供100mL瓶装
储存条件：2°C至8°C冷藏保存，避免冷冻
有效期：见产品标签，通常为2年

2. 使用前准备

检查外观：确保液体清澈无沉淀，颜色为淡黄色至无色。
恢复至室温：从冰箱取出后，静置至室温（约15-30分钟）。
无菌操作：在超净台或生物安全柜中进行操作，以避免污染。

3. 细胞冻存步骤

(1) 细胞准备：
确保细胞处于健康状态，活率达到90%。
使用细胞计数仪或血球计数板计数，并调整细胞密度至1×10^6至1×10^7 cells/mL。
将细胞悬液离心（例如，300×g，5分钟），弃去上清。
(2) 重悬细胞：
根据细胞沉淀量加入适量CryoStor® CS10，并轻轻吹打混匀。
将细胞悬液分装至冻存管中，每管1-2mL。
(3) 冷冻程序：
使用程序降温盒或程序降温仪，以-1°C/min的速率降温至-80°C。
若无程序降温设备，可将冻存管放入异丙醇降温盒，置于-80°C冰箱过夜。
24小时后，将冻存管转移至液氮罐中进行长期保存。

4. 细胞解冻步骤

(1) 快速解冻：
将冻存管从液氮中取出，迅速放入37°C水浴中，轻轻摇晃至完全解冻（约1-2分钟）。
解冻后立即从水浴中取出，以避免高温对细胞造成损伤。
(2) 洗涤细胞：
将解冻的细胞悬液缓慢加入预热的完全培养基中（如10倍体积），轻轻混匀。
进行300×g离心5分钟，弃去上清，并用新鲜培养基重悬细胞，以便进行后续培养或实验。

5. 注意事项

DMSO浓度：CryoStor® CS10含有10% DMSO，部分细胞可能对DMSO敏感，因此需要优化浓度。
无菌操作：全程应注意避免污染，尤其是在分装和解冻步骤中。
解冻速度：快速解冻有助于减少冰晶对细胞造成的损伤。
细胞密度：冻存时细胞密度不宜过高或过低，推荐范围为1×10^6至1×10^7 cells/mL。

6. 适用细胞类型

干细胞：如间充质干细胞（MSCs）、造血干细胞（HSCs）。
免疫细胞：如CAR-T细胞、NK细胞。
原代细胞：如肝细胞、神经元。
细胞系：如HEK293、CHO细胞。

7. 常见问题解答

(1) CryoStor® CS10可以稀释吗？
不建议稀释，以免影响冻存效果。如需降低DMSO浓度，可以选择CryoStor® CS5（含5%DMSO）。
(2) 冻存后细胞存活率低怎么办？
首先检查细胞状态，确保冻存前细胞健康。同时，优化冻存密度并调整至推荐范围（1×10^6至1×10^7 cells/mL）。检查冻存程序，确保降温速率和解冻速度符合要求。
(3) CryoStor® CS10可以用于组织冻存吗？
可以，适用于小组织块的低温保存，但需根据组织类型优化冻存条件。

总结来说，CryoStor® CS10是一款高效、无血清的细胞冻存液，适用于多种细胞类型的低温保存。通过严格遵循操作步骤和注意事项，可以确保细胞在冷冻和解冻过程中保持高活性和功能的完整性。

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